回收试验的原理

回收试验，又称recovery test，是一种对照试验方法，主要用于评估分析方法的准确性和可靠性。其基本原理是在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样的分析方法进行测定。通过比较测定值与理论值（即样品中原有的浓度加上加入的浓度）之间的比例，计算出回收率，从而判断分析过程是否存在系统误差。

具体步骤

1. 准备样品：选取已知浓度的样品作为测试对象。

2. 加入已知量的被测物：在样品中定量加入已知浓度的被测物。

3. 进行测定：使用相同的分析方法对加入被测物后的样品进行测定。

4. 计算回收率：将测定值与理论值（样品中原有的浓度加上加入的浓度）进行比较，计算回收率。回收率的计算公式如下：

   回收率=(测定值理论值)×100%。

   类型

   回收率包括绝对回收率和相对回收率两种类型：

   • 绝对回收率：考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。它要求一般大于50%。绝对回收率是在空白基质中定量加入药物，然后进行处理并与标准品进行比较得出的。

   • 相对回收率：严格来说有两种方法。第一种是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种方法使用较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物，然后与标准曲线进行比较，标准曲线也是在基质中加药物得出的。

   目的

   回收试验的主要目的是验证分析方法的准确度，确保测定结果与真实值或认可的参考值之间的接近程度。这对于定量测定的检测项目尤为重要，如含量测定、杂质定量试验等。

   通过回收试验，可以有效地评估和改进分析方法，提高实验数据的可靠性和准确性。

   回收试验

   回收试验，英文称作recoverytest，是对照试验的一种。 当所分析的试样组分复杂，不完全清楚时，向试样中加入已知量的被测组分，然后进行测定，检查被加入的组分能否定量回收，以判断分析过程是否存在系统误差的方法。 所得结果常用百分数表示，称为百分回收率，简称回收率。 一般实验方法应在100±5%为合格。 回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一。 回收试验 回收率包括绝对回收率和相对回收率。 绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。 因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。 作为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。 它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。 标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。 若一样，只是不加基质来处理，可能会亚存临护各考庆是有很多影响因素被此屏蔽掉。 如全部转移有机相时只转移了98%等。 也就损婷气业尔愿减信危因此失去了绝对回收率的考察初衷。 相对回收率严格来说有两种。 一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。 前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测茶阶历坐尼科定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。 第二种是在已知浓度样品细二式印了离祖染践击中加入药物，来和标准曲线比，标害答策果站某小送准曲线也是在基质中加药物。 准确度系指用该方法测定的结果与真实值故施春界茶究呢统游消或认可的参考值之间接近的程度。 有时热按是阳突月总号头越也称真实度。 一定的复境行雷振目准确度为定量测定的必打标滑般图要条件，因此涉及到定量测建降型措角径味合住磁定的检测项目均需要验证准确度，如含量测定、杂质定量试验等。 准确度应在规定的范围内建立，对于制剂一般以回收率试验来进行验证。 试验设计需考虑在规定范围内，制备3王放区又沉个不同浓度的试样，各测定3次，即测定9次，报告已知加入量的回收率(%)或测定结果平均值与真实值之差言好班探查斯段特毫德怕及其可信限。 原料药可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定，或用本法医所得结果与已建立准确度玉身效都列我甚解的另一方法测定的结果进行比较。 制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。 一般制剂的含量测定的回收率是向辅料中加入处方量80%、100%、120%已知含量的主药，按含量测定的方法测定。

   回收试验

   回收试验-在已知浓度的样品中加入一定量的被测物然后用同样方法测定测定值与理论值样品浓度和加入浓度之和之比乘以100即为回收率一般实验方法应在1005为合格授课对象:06级检验1-5班课时:2学时回收试验目标:Leabharlann回收试验在已知浓度的样品中加入一定量的被测物然后用同样方法测定测定值与理论值样品浓度和加入浓度之和之比乘以100即为回收率一般实验方法应在1005为合格回收试验目标:LeabharlannBaidu.掌握回收实验的基本原理

   回收试验.docx

   回收试验目标:回收试验目标:---回收率实验的设计实验用品:(以二乙酰法测BUN为例)水浴箱(100)、721型分光光度计、混合血清、(①②③)、BUN标准液(100mmol/L、200mmol/L、)等一、原理:在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样方法测定，测定值与\"理论值\"(样品浓度和加入浓度之和)之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。

   回收率试验

   回收率试验的全部标准:回收率试验HPLC中的加样回收率试验怎么做回收率包括绝对回收率和相对回收率。 绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。 做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。 它是在空白基质中定量加入药物，很多小伙伴总是做不好空白实验，并为此头疼不已，那么，空白试验怎么做加标回收试验怎么做应该注意些什么看完下文你就都懂了。 一、空白实验1.空白实验的定义空白实验(空白测定)指除用水代替样品外，其它所加试剂和操作步骤均与样品测定完全相空白试验和加标回收率的相关知识汇总!一、空白实验1.空白实验的定义空白实验(空白测定)指除用水代替样品外，其它所加试剂和操作步骤均与样品测定完全相同的操作过程。 2.空白实验值样品分析的响应值(如吸光度、峰高等)，通常不仅是样品中待测物质的的响应值如何控制土壤分析质量检测员必学干货实验室内部质量控制大盘点紫外分光光度法测定复方硫磺乳膏的含量紫外分光光度法测定复方硫磺乳膏的含量气相色谱仪顶空进样的重现性rsd多少合适准确度、正确度、精密度的区分使用全自动凯氏定氮仪测定肉制品中的氮含量反相高效液相色谱法测定糠酸和糠醇紫外分光光度法测定白酒中的DEHP含量复方甘草酸铵注射液中2种氨基酸含量测定直接测汞仪测定食品中总汞含量及结果分析火焰原子吸收光谱法测定人参及其水煎液中的微量元素回收率试验用几个样品回收率试验怎么做啊制剂回收率试验回收试验回收率范围回收率太低一文了解微量热泳动仪原理!质谱技术实践与应用研讨会|一文看懂什么是代谢组学!质谱学先驱MarvinVestal去世，他的一生就是质谱的发展史立足国产质谱推动质谱新技术研发\"爱科学逐梦想\"莱伯泰科点亮中国下一代人的科学灯火5分钟了解，应急监测如何选择便携GC-MS熠品-安捷伦签订战略合作协议联合共建研发和分析平台江桂斌院士等173名导师获\"2022中国科学院优秀导师\"称号岛津丨李培武院士团队专访:守护粮食安全的幕后英雄们朱正江:软件平台自主创新破冰代谢组学研究难点17:48:48实验小鼠对女性的\"偏爱\"和对男性的\"厌恶\"，直接影响了……17:48:48孤独症小鼠\"喜新不厌旧\"社交缺陷下的神经编码机制17:46:12别为减肥戒掉碳水!《自然》子刊:多吃碳水或能防抑郁17:46:12科兴\"再战\"新冠广谱抗体能否为\"终结疫情\"打开新局面17:46:12启动子和转录因子在动植物细胞中有不同的共演化模式17:39:24JAMA子刊:中老年人更需警惕\"啤酒肚\"17:39:24更高剂量的CAR-T细胞产品tisagenlecleucel可导致更高的存活率17:39:24男性注意!这种食品摄入过多会导致结直肠癌17:39:24Science:皮肤表面产生的羟基自由基变成有毒的化学物17:38:45《科学》子刊:腺病毒载体疫苗让免疫治疗\"战力爆棚\"!。

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   第*页实验三GOD-POD法测定葡萄糖的回收和干扰试验第*页1.掌握GOD-POD法测定葡萄糖的原理2.掌握回收及干扰试验的原理及目的3.熟悉回收及干扰试验的设计原则及注意事项4.了解回收及干扰试验的操作方法实验目的(一)GOD-POD法测葡萄糖原理GOD葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2PODH2O2+酚+4-AAPH2O+醌亚胺(红色)在500nm波长下测吸光度，吸光度大小与葡萄糖浓度成正比。 (一血糖测定原理实验原理第*页实验原理(二)回收试验定义:分析某临床检测方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力。 方法:将不同浓度的被分析物的标准溶液加入到病人样品中，成为回收样品，而原样品加入相同量的无分析物的溶剂作为基础样品，用试验方法同时测定分析，两者之差即为回收浓度，回收浓度与加入浓度的百分率为回收率。 合格的回收率应为100%±5%。 (三)干扰试验目的:评价候选方法的准确度。 是检测特异性和干扰二者所引起的误差。 方法:加入一定浓度的干扰物，形成恒定系统误差(误差的实际大小随干扰物浓度而异)，并将其测定出来。 既用于检测某方法的特异性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用。 其方法与回收相似，不同的是所加入的是疑有干扰或非特异性反应物质，而不是标准液。 关于回收与干扰回收率接近100%分析不受基质影响。 即无论在纯溶液还是复杂的基质环境中，分析方法的反应能力是一样的。 (准确度不受影响)回收率明显偏离100%分析明显受不同的基质影响。 (准确度受影响)干扰和特异性特异性如某些非分析物的化学性质与分析物接近，与试剂发生反应为特异性差(如ALT测定时游离酮酸的存在反应，TG测定中游离甘油)。 回收实验设计原则1.标准液(1)要求高纯度标准品。 (2)加入的液体体积要小，一般不超过总体积的10%。 (3)浓度要比欲加的浓度至少高10倍。 可直接加入固体标准品。 (4)回收样品一般制备高、中、低三个浓度水平。 高浓度应低于线性范围的上限，加入被分析物浓度后最好使总被测物浓度在医学决定水平附近。 2.准确吸量。 3.一般重复测定2-3次取均值。 干扰试验设计原则加入干扰物溶液的体积要小。 但不如回收严格。 加入可疑干扰物的浓度须达到有价值的范围。 有可能应达到病理标本的最高浓度值。 在确证有影响后应测定在何浓度时，产生的误差在临床上无意义，即确定使分析结果影响临床应用价值的最低可疑物浓度值。 干扰试验通常考虑胆红素、血红蛋白、脂浊、防腐剂、抗凝剂、药物等。 GOD-POD法测定GLU的试剂(R1:R2=3:1，混匀使用。 )2.55.56mmol/L(1000mg/dl)的葡萄糖标准液(回收试验用)3.27.78mmol/L(500mg/dl)的葡萄糖标准液(回收试验用)4.葡萄糖校准液5.55mmol/L(500mg/dl)(标准管用)5.维生素C注射液5mg/ml(干扰试验用)试剂与器材(一)回收试验1.回收样本制备1、U0基础样品:血清0.45ml+0.05ml蒸馏水2、U1回收样品Ⅰ:血清0.45ml+0.05ml(1000mg/dl)的葡萄糖标准液3、U2回收样品Ⅱ:血清0.45ml+0.05ml(500mg/dl)的葡萄糖标准液4、U3回收样品III:血清0.45ml+0.025ml(500mg/dl)L的葡萄糖标准液+0.025ml蒸馏水步骤2.样本测定(每人一套)混匀，37水浴10分钟，520nm波长，B管调吸光度零，计算各管浓度。 (二)干扰试验1.干扰物维生素C浓度确定通常维生素C最大注射用量为1g/天，假设其分布在5L血浆中，则血浓度为200mg/L，即0.2mg/ml，我们将最大干扰浓度大概定为0.5mg/ml。 2.干扰样品制备U0基础样品:血清0.45ml+0.05ml蒸馏水U1干扰样品Ⅰ:血清0.45ml+0.05ml10mg/ml维生素C溶液U2干扰样品Ⅱ:血清0.45ml+0.025ml10mg/ml维生素C溶液+0.025ml蒸馏水U3干扰样品Ⅲ:血清0.45ml+0.01ml10mg/ml维生素C溶液+0.04ml蒸馏水样本测定混匀，37水浴10分钟，520nm波长，B管调吸光度零，计算各管浓度。 1.加入浓度=标准液浓度2.回收浓度=分析样品测得浓度–基础样品测得浓度3.回收率(%)=4.平均回收率(%)=三个浓度的回收率平均值。 一般要求回收率95~105%，比例系统误差=100%-平均回收率。

   什么是回收实验

   什么是回收实验 什么是回收实验?回收实验是临床实验室质量管理常考的内容，如果还不清楚的考试请看医学教育网整理的相关内容，希望能给您带来帮助。 1.含量测定原料药可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。 制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。 如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，必要时，与另一个已建立准确度的方法比较结果。 一般制剂的含量测定的回收率是向辅料中加入处方量80%、100%、120%已知含量的主药，按含量测定的方法测定。 2.杂质定量试验杂质的定量试验可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。 如果不能得到杂质，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过验证的方法。 如不能测得杂质的相对响应因子，可在线测定杂质的相关数据，如采用二极管阵列检测器测定紫外光谱，当杂质的光谱与主成分的光谱相似，则可采用原料药的响应因子近似计算杂质含量(自身对照法)。 并应明确单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比(%)或面积比(%)。 分享到: 医考爱打卡 仿真历年考点题 专业题目解析 原价:￥199 联报/复购￥159.2 ·仿真试卷实战演练 ·组队刷题互相激励 4006501888

   PCR基因扩增及扩增产物的回收实验原理及过程

   PCR基因扩增及扩增产物的回收实验原理及过程 同时，我们要掌握PCR基因扩增及扩增产物的回收的基本原理和实验技术方法。 实验原理及过程 实验步骤 实验原理 1PCR体系的准备和PCR扩增的开始 2.5mmol/LdNTPMixture4.0uL 10xbufferMg2+Ex-TaqEddH2O40uL primer4uL 模板DNA2uL 940C，2’940C1’420C1’720C2’720C10’I---30cycles---I 在合适条件下，这种循环不断重复，前一个循环的产物可作为后一循环的模板参与DNA的合成，最终使产物DNA的量按2n方式扩增。 理论上讲经过30次的循环反应，DNA扩增倍数为106-109。 PCR引物的设计至关重要，3’端要严格配对，5’可以引入酶切位点，也可以由此控制Tm值和CG的比值。 循环数超过30个以后，因为产物数量增加和反应物数量的减少，反应速度降低，这时对反映的产率已经没有贡献，反而副产物增多，影响效果。 所以，循环数不应超过30。 2PCR产物电泳 0.8%Agarose(1×TAE)80伏恒压电泳 全部PCR产物上样电泳: 6uL10xloading 6uLSYBR marker部分: 10uLmarker(含loadingbuffer) 1uLSYBR 因为PCR产物会有一些副产物，所以要用电泳的方法分离各种PCR产物。这样也能分离TaqE等杂质。 为了分辨PCR产物和PCR副产品，需要跑一个分子量marker，我们的产物是1.6kp。 用TAE的原因是高严可以降低Agarose熔点，促进之后的DNA吸附。 3PCR产物的回收(玻璃奶吸附法) 1)紫外灯下切胶，称胶重 SYBR会使DNA部分显出绿色荧光，在紫外灯下辨认绿色荧光，可将胶切下。 2)每100mg胶加入300uL溶胶液，50oC溶胶让DNA充分释放到液体中。 3)将在-20oC冻存的玻璃奶解冻，振匀!!玻璃奶为细微的玻璃小颗粒，因酷似奶状而得名。 它为悬浊液，而可以起吸附作用的小颗粒会沉降下来，所以，只有摇匀，我们才能渠道足量的玻璃小颗粒，完成分离的过程。 4)在溶解后的胶液中加入10uL玻璃奶，吹打均匀，冰浴沉淀10min，10，000rpm离心1min，去上清。 这是一个类似于吸附层析的过程。 DNA会特异的吸附于玻璃奶的小颗粒上，而胶不会吸附于其上，故可以起到分离的效果。 5)在离心所得沉淀中加入200uL稀释浓缩洗胶液(3体积浓缩洗胶液加入7体积无水乙醇即得稀释液)，吹打均匀，10，000rpm离心1min，去上清，如此洗两次。 这是一个洗涤的过程。 6)500C干燥。 7)加入20uLTE，吹打均匀，60oC5-10min溶解DNA，12，000rpm2min，收集上清为回收的PCR产物，-20oC保存。 此步骤是解析。 8)检测是否含有DNA 取2uLDNA混合0.5uLSYBR，直接到紫外灯下观察，若有绿色荧光，则证明有DNA存在。 本次试验中，在最后一步检测中看到了荧光，说明了DNA的存在，证明回收到了PCR的产物

   回收试验

   回收试验:当无法获得标准试样时，分析方法的准确度用回收试验的结果来衡量。 回收试验是先用所建方法测出试样中某组分含量，再取几份相同试样(n≥5)，各加入适量待测组分的纯品，按相同条件进行测定回收率越接近100%，系统误差越小，方法准确度越高。 回收率偏低可能是样品制备不当、提取不完全或方法本身的系统误差所致;。 回收试验 资料下载打卡学习2024年课程回收试验:当无法获得标准试样时，分析方法的准确度用回收试验的结果来衡量。 回收率偏低可能是样品制备不当、提取不完全或方法本身的系统误差所致;回收率偏高则可能和方法选择性差，杂志干扰等因素有关。 回收试验常在微量组分分析中应用。 2024年万人模考【二模】正式开始，立即来做题2024年考前密训班28天直播锁定高频考点速效提分!【免费刷】医学题库0元刷，大量免费题目等你解锁2024年执业药师【思维导图】等热门资料免费下载【好课】2024执业药师无忧实验班，学霸同款课程!【题库】2024执业药师密题库，老学员复购享8折!免费资料 【免费直播】2021执业药师牛年第一课-中药综专场! 直播时间:3月10日19:30-21:00

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   操作系统之设备管理:独占设备的分配和回收模拟【全面代码&原理解释】 3篇文章4订阅 一、实验目的与要求 了解设备管理的基本原理、设备的分配与回收过程。 二、实验内容 1、复习设备管理的基本概念、基本原理、常用的数据结构、分配策略及算法 2、编制一个独占设备的分配和回收模拟程序 三、实验原理 首先利用结构体equiptype定义系统设备类型表，利用结构体equipment定义系统设备表。 本实验假设系统共有4类设备，分别是输入机2台、打印机3台、磁盘机4台、磁带机1台，共10个设备。 实验共有3个函数，其中主函数main完成设备类表和和系统设备表的初始化工作并提供设备分配、设备回收、显示系统设备状态三种功能菜单输入，源代码见下。 allocate(charJ[]，chartype[]，intmm)函数完成具体设备分配工作，其中参数J用字符串表示作业名，type表示设备类型名，mm表示设备的逻辑名称。 工作流程如下: 首先根据type[]参数查找设备类型表，如无该类设备，则提示分配失败;如有该类设备，则进一步查找设备表，看有没有空闲的该类设备，如没有，则提示分配失败;如有空闲设备则实施分配，并将J、mm参数填到equipment结构体jobname、lnumber成员中，并将remain置为1，同时equiptype结构体中的remain自减1，表示分配成功。 reclaim(charJ[]，chartype[])函数完成具体设备回收工作，其中参数J[]用字符串表示作业名，type[]表示设备类型名。 首先根据type[]参数查找设备类型表，如无该类设备，则提示回收失败;如有该类设备，则进一步根据J[]参数查找设备表，看该作业是否占有该设备，如是equiptype结构体中的remain自加1，同时将equipment结构体中的jobname成员置为空、lnumber成员置为0，remain置为0，表示回收成功;如该作业没有分配该设备，则显示回收失败。 设备回收和设备分配函数，由学生根据实验原理自行编写。 四、程序代码

   回收率试验

   对于食品中的禁用物质，回收率应在方法的测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法测定低限进行三水平试验;对于已制定最高残留量(MRL)的，回收率应在方法测定低限、MRL，选一适合点进行三水平试验;对于未制定MRL的，回收率应在方法测定低限、常见限量指标，选一适合点进行三水平试验。 一、参观我使用标液进行检测近二十年，但还未参观过标液的生产过程，此次是抱着好奇心去的，通过参观伟业计量与北纳生物两家工厂，给我留下极其...初识标准物质--北方伟业计量集团有限公司探厂之旅作者:中国海关海科中心装备所--邱烨.作为一名检测及验证的一线技术人员，个人深知标准物质对仪器设备和检测结果的重要性，也经常会使用到标准物质，但是却从没有机会能了解到标准物质的生产过程，也一直都对这个过程充满了好奇，例如:标准物质是如何进行生产的生产环境和设备是怎样的等等。 很荣幸能与各领域的专家老师一起参加原创大赛特别策划\"内容创作者\"探访厂商活动，此行目的--伟业计量。

   回收率试验

   回收率试验《提高喀拉通克铜镍矿选矿回收率试验》;;回收率试验;;4.当我们建立了一个新的药物分析方法时，为了考察它的精确度和可行性就必须做回收率试验、即将已知标准品定量投入制剂中，用确定的方法测出其含量并根据投入量计算得率的试验。 作为一个完1991年05期回收率试验对照试验;;5.目的:用于证实间苯三酚淋洗水回收率试验限度为2μg/ml时的检验方法的正确性及可靠性。 结论:2013年03期淋洗水回收率;;间苯三酚对照;;6.为了提高大吉山钨选厂的细泥回收率，赣州有色冶金研究所根据目前矿物与脉石矿物和硫化矿的密度差与可浮性差异，采用重选和浮选法进行富集，即将原次生细泥合并(品位为0.24%WO_回收率试验大吉山钨矿钨细泥;;7.针对鲁中选矿厂弱磁性矿精矿品位及回收率偏低的问题，在流程考查的基础上开展了大量试验研究，实验结果表明采用正浮选工艺可大幅提高弱磁性矿精矿品位及回收率。 工业改造后流程运行稳定，生产指;;离心机;;离心跳汰;;弱磁性矿;;9.本文从物理干扰、化学干扰及化学结构的影响诸方面讨论了准确度对回收试验的要求，以期引起分析工作者的关注，从而正确设计回收率试验，达到科学判断分析方法准确度的目的。 2000年04期回收率试验;;10.用5台不同型号的紫外分光光度计，在239um处对盐酸阿米替林进行E_(cm)~(1%)的测定，平均E_(cm)~(1%)值为442，RSD%为0.70。 经对盐酸阿米替林回收率的测定。

   二次油气回收系统基本原理(1)

   二次油气回收系统基本原理(1)二次油气回收系统基本原理图3三次回收(油气排放处理装置)由于汽油非常容易挥发，当油罐系统温度升高时，汽油蒸发加剧，会引起呼吸阀排放油气;由于热胀冷缩现象，当油罐系统温度降低时，呼吸阀会吸入空气，当二次油气回收系统基本原理图3三次回收(油气排放处理装置)由于汽油非常容易挥发，当油罐系统温度升高时，汽油蒸发加剧，会引起呼吸阀排放油气;由于热胀冷缩现象，当油罐系统温度降低时，呼吸阀会吸入空气，当油罐系统温度再次升高时，也会引起呼吸阀排放油气。图3、三次油气回收系统基本原理图目前国内外对加油站三次油气回收的治理主要有冷凝法、吸收法、吸附法、膜分离法几种方法，以及它们的组合工艺。(1)冷凝法是利用油气在不同温度和压力下具有不同的饱和蒸气压，通过降低温度或增加压力，使油气首先凝结出来。

   实验三 从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA

   实验三:从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段一.实验目的学习经琼脂糖凝胶电泳分离后回收并纯化DNA片段的方法二.实验原理将DNA样品在琼脂糖凝胶电泳后，在紫外灯下切割.. 实验三从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA.doc dna琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳原理琼脂糖凝胶配制琼脂糖凝胶浓度琼脂糖凝胶琼脂糖凝胶的制备rna琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳步骤质粒琼脂糖凝胶电泳 实验三:从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段一.实验目的学习经琼脂糖凝胶电泳分离后回收并纯化DNA片段的方法二.实验原理将DNA样品在琼脂糖凝胶电泳后，在紫外灯下切割下含目的DNA片段的凝胶块;在高盐和促溶剂的作用下，琼脂糖聚合物中糖之间的氢键断裂而迅速溶解，DNA就从胶基质中释放出来并选择性地吸附到球状的硅胶颗料或特定的柱子上;然后用高盐缓冲液洗涤除去残余的琼脂糖，再用含乙醇的缓冲液洗去盐和染料。 最后用TE缓冲液或水将球状硅胶颗粒或柱子上的DNA洗脱下来。 回收纯化后的DNA可直接用于DNA的连接反应、标记反应、测序反应或DNA的微量注射等研究。 三.实验材料1.水浴锅、离心机、移液器2.PCR扩增的Rv1791基因3.AgaroseGelDNAPurificationKitVer.2.0(Taraka)四.实验步骤(1)实验三中的PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳。 (2)在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面的液体。 切胶时不要将DNA长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。 (3)切碎胶块。 胶块切碎后可以减少步骤6的胶块融化时间，提高DNA的回收率。 (4)称量胶块重量，计算胶块体积。 计算胶块体积时，以1mg=1μl进行计算。 (5)向胶块中加入3倍凝胶体积的胶块融化液DR-IBuffer。 (6)均匀混合后75℃加热融化胶块，此时应间断振荡混合，使胶块充分融化(约6～10min)。 (7)向上述胶块融化液中加入DR-IBuffer量的1/2体积量的DR-IIBuffer，均匀混合。 (8)离心柱放入收集管中，将步骤7的溶液转移至离心柱中，12，000rpm，1min，弃滤液。 (9)将500μl的RinseA加入离心柱中，12，000rpm，30s，弃滤液。 (10)将700μl的RinseB加入离心柱中，12，000rpm，30s，弃滤液。 (11)重复操作步骤10，将离心柱放入收集管中，12，000rpm，1min。 (12)将离心柱放入新的指形管中，在离心柱膜的中央处加入25μl的灭菌蒸馏水或ElutionBuffer，室温静置1min。 (13)12，000rpm，1min，洗脱DNA。 五.实验结果根据电泳结果，描述对DNA片段回收的结果与效率。 三.思考题凝胶抽提法回收纯化DNA片段的原理是什么?将DNA样品在琼脂糖凝胶电泳后，在紫外灯下切割下含目的DNA片段的凝胶块;在高盐和促溶剂的作用下，琼脂糖聚合物中糖之间的氢键断裂而迅速溶解，DNA就从胶基质中释放出来并选择性地吸附到球状的硅胶颗料或特定的柱子上;然后用高盐缓冲液洗涤除去残余的琼脂糖，再用含乙醇的缓冲液洗去盐和染料。

   加标回收试验的定义和步骤 - 企业动态

   通常的具体做法是:准备两份完全一致的样品，向其中一份添加标准物质，随后，将这两份样品按相同的检测方法进行检测，依据两个样品检测结果和标准物质添加量计算加标回收率，根据回收率结果评价方法和操作的准确性。 回收率计算公式为: 由此可知，公式中的加标试样测定值应为加标试样的总质量值(在体积一致的情况，可以用总浓度值)，而试样测定值应为原样在加标试样的质量值(在体积一致情况，可以用浓度值)，两者均可由实验测定数据直接给定。 加标量应为标准物质在加标试样的总体积中形成的质量值(在体积一致的情况，可以用浓度值)，由添加标准物质浓度、体积或质量直接给出。 回收率试验用于质量控制的原理相对比较简单。 回收率是添加待测物质标准物质后，通过方法测定结果计算得到该物质的测定值与添加操作步骤实际添加该物质量的百分率值。 由于添加标准物质的含量是可依据添加标准物质纯度和质量(或溶液体积)准确计算获得的，这样，加标试样测定值即可反映该测试方法或操作是否存在问题。 从理论上讲，一个准确可靠的方法，一个熟练的操作人员进行回收率试验，回收率的结果应在合理的范围内，回收率的平均值应接近100%，否则说明方法可能存在系统误差。 多次测定回收率的标准偏差也应处在某一水平。 任何某次测定回收率结果的异常偏差或波动可能反映该次测定结存在问题。 因此，根据回收率的结果可监控测试结果的质量。

   了解油气回收检测,从了解它的工作原理开始-广电计量检测集团股份...

   油气回收检测的目的是减少挥发性有机气体的排放，降低PM10、PM2.5等挥发性有机物的浓度，是当前防治汽油油气大气污染的重要手段之一。 而油气回收检测项目因子是衡量油气回收综合治理效果的重要评断指标。 油气回收检测的工作原理 1、一次油气回收阶段是通过压力平衡原理，将在卸油过程中挥发的油气收集到油罐车内运回储油库进行回收处理的过程。 该阶段在油罐车卸油过程中，车有车内压力减小，地下储油罐内压力增加，地下储罐与油罐车内的压力差使得卸油过程中挥发的油气通过管线回到油罐车内，达到油气回收的目的。 2、二次油气回收阶段既加油的同时进行的油气回收系统。 该阶段是采用真空辅助式油气回收设备，将加油过程中挥发的油气通过地下油气回收管线手机到地下储油罐内的油气回收过程。 在加油站为汽车加油的过程中，通过真空泵产生的真空压力，经过设置在加油枪上的油气回收管线等设备按照气液比控制在10~12范围的要求，将加油过程中挥发的油气回收到油罐内。

   GOD-POD法测血糖与回收试验

   GOD-POD法测血糖与回收试验.ppt 2.掌握回收试验的原理和方法。 1.血清中(溶液中)的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶作用下，使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。 红色醌类化合物生成量与葡萄糖含量成正比，在492nm下测定吸光度值，与葡萄糖标准液比较，即得到待测液葡萄糖浓度。 葡萄糖氧化酶葡萄糖葡萄糖酸+H2O2过氧化物酶H2O2+苯酚+4氨基安替比林红色醌2.回收试验用于评价候选方法的比例系统误差，通过正确测定加入常规分析样品中的纯分析物，计算回收率来判断比例系统的误差的大小，对方法的准确性做可靠性评价。 试剂:1.葡萄糖测定试剂盒:5.55mmol/L葡萄糖标准液、R1:磷酸盐缓冲液100mmol/LpH7.5、苯酚10mmol/L、R2:磷酸盐缓冲液100mmol/LpH7.5，葡萄糖氧化酶16000U/L，过氧化物酶1000U/L，4-氨基安比替林2.0mmol/L2.80mmol/L葡萄糖溶液、蒸馏水、生理盐水3.血清器材:酶标仪，酶标板，板条，微量进样器，1.5ml塑料离心管，试管1.配置测血糖的工作试剂:取R14.5ml与R20.5ml混合在10ml试管中。 2.测定样本血糖浓度:取酶标板一块，板条一条，设定空白孔A1，标准孔A2，A3，测定孔A4，A5。 A1A2A3A4A5血清---------2ul2ul葡萄糖标准---2ul2ul------蒸馏水2ul--工作试剂ul200200200200200加入物孔号混匀置于37℃生化培养箱，保温15min，在波长492nm酶标仪，比色测定，空白管调零，读取标准管及测定吸光度。 3.1)根据测定的血糖值，用生理盐水稀释至2.2mmol/L，标记为样品A。 2)制备基础样品及回收样品基础样品:样品A0.45ml+0.05ml生理盐水回收样品Ⅰ:样品A0.45ml+0.005ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.045ml生理盐水回收样品Ⅱ:样品A0.45ml+0.03ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.02ml生理盐水回收样品Ⅲ:样品A0.45ml+0.045ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.005ml生理盐水3.3)在另一酶标板条上设:A1空白(加生理盐水)，A2，A3标准[加入葡萄糖标准(5.55mmol/L)]A4A5，A6A7，A8A9，A10A11，加以上4个样品各2ul，进行测定(用血糖测定方法)结果取平均值。 3.3加入物(ml)A1A2A3A4A5A6A7A8A9A10A11生理盐水2——葡萄糖标准液——2————————基础样品————2————-——回收样品1——————2————回收样品2————————2——回收样品3——2工作试剂200200200200200200混匀后孵育15min，在波长492nm酶标仪中比色测定1.血清浓度测定2.加入浓度计算:样品I加入浓度=3.回收量计算(测得浓度-基础样品的测得值)4.5.计算平均回收率。 80×0.0050.45+0.005+0.0451.血清浓度的测定吸光度:A1A2A3(标准管)A4A5(测定管)0.0000.2320.2410.1810.185平均吸光度:A1A2A3A4A50.000(0.232+0.241)/2=0.2365(0.181+0.185)/2=0.183血糖浓度=测定管吸光度平均值/标准管吸光度平均值*5.55(等于)=0.183/0.2365*5.55mmol/l=4.26mmol/L2.加入浓度的测定加入浓度(mmol/L)=标准液浓度*标准液量(ml)/[血清量(ml)+标准液量(ml)+生理盐水(ml)]样品I加入浓度=80*0.005/(0.45+0.005+0.045)=0.8mmol/L样品II加入浓度=80*0.03/(0.45+0.03+0.02)=4.8mmol/L样品Ⅲ加入浓度=0.045*80/(0.45+0.005+0.045)=7.2mmol/L3.回收量计算(测得浓度-基础样品的测得值)①样品A浓度配置:样品A浓度配置:测得牛血清葡萄糖浓度为4.26mmol/L，稀释至2.2mmol/L。 估计总加入牛血清样品2Ml，则设需4.26mmol/L血清vml，根据C1V1=C2V2则2.2mmol/L*2ml=4.26mml/L*vmlV=2.2*2/4.26ml=1.03ml，因此需要4.26mmol/L牛血清1.03ml，加入生理盐水0.97ml(2—1.03)配置浓度2.2mmol/L的血清2Ml。

   加标回收实验的实施及回收率计算

   加标回收实验的实施及回收率计算 文献[2～4]报道了用实验中间结果直接计算回收率的方法，一定条件下可简化计算，但有其局限性。 工作中发现，由于操作人员对回收实验认识模糊，在进行加标实验时盲目性大，容易引入误差，使实验复杂化，造成回收率误算甚至导致实验失败。 因此，科学合理地组织加标实验，对保证实验的质量，提高工作效率具有一定的实际意义。 但这方面未见详细报道。 1加标实验的一般原则7u3X(i-B4M6R (1)一致原则:样品与加标样同时按同一操作步骤和方法测定，保证实验条件一致。 为提高准确度，样品和加标样可分别进行平行测试。 (2)可比原则:加标样中原始样品的取样体积、稀释倍数及测试体积，尽可能与样品测试时一致。 (3)相近原则:加标量应与样品中相应待测物含量相近，一般为试样含量的0.5～2倍，加标后的总量不超过测定上限，如含量小于检出下限时，可按检出限量加标。 (4)不变原则:加标物的浓度宜高，加标体积宜小，一般不超过原始试样体积的1%，保持样品的基体不变。 (5)适用原则:容易实施，便于回收率计算。 2加标实验的基本思路分析化学，论坛，化学分析，仪器分析，分析测试，色谱，电泳，光谱，X#H#p-|$q7D 2.1加标方式 虽然加标方式各异，但都可以归结为如下形式。分析化学论坛.k:j6u，X*K.K。 样品分析:样品体积为V，被测成分质量浓度为C1，测试体积为V1 加标实验:加标后样品总体积为V2，质量浓度为C2，测试体积为V2，加标样中含原始样品体积为V1;www.33ge.com#M!U%xT!v0_8I$W7V;\\8k(X 加标量:加标体积为Vs，质量浓度为Cs。 显然，V2≥V1+Vs，取=时，是在V1样品中加入Vs标液形成加标样;取时，是在V1样品中加入Vs标液后稀释到V2形成加标样。 一般地使V1=V，V2=V1+Vs，即取相同体积的2份样品，其中1份加标，1份不加标，这是最常用的加标方式。 2.2回收率计算 根据假设和回收率定义，可得:www.33ge.com1L)~5q4}*x;V\'\'K;]3J R =V2?C2 - V1?C1/Vs?Cs×100 % …………(1)n\'\'y0R9N%{7C，M 式(1)是以被测物质的含量变化求取回收率的，简单明了，易于理解，适用于任何方式的加标实验，因此可作为回收率计算的通式。 式(1)可变形为:x#h0i2u\'\'T。 R =(C2 - V1 C1/ V2)/Vs?Cs / V2×100 %………… (2)分 \'\'g6\\%v+T5~)C-n0o。 2.3讨论 (1)V1=0，即零空白加标。 取Vs标样稀释至V2或直接取Vs标样作为加标样(此时V2=Vs)，对标准物质进行量值追踪，可用于干扰实验、方法的可行性研究、系统误差检验、实验过程的损失率、吸收效率的验证等。 那么:www.33ge.com1l:n*y4n7A+a7?*~。 R=V2?C2/Vs?Cs×100%或R=C2/Cs×100%ww (2)V2=V1+Vs且V1≈V2。 当Vs很小，不超过V1的1%时，可忽略样品体积的变化，认为V1=V2，式(1)变为:。 R =V1?( C2 - C1)/Vs?Cs×100 % 这种方式比较直观，没有体积换算的麻烦，适用于所需样品量较大的项目和组分复杂的污染源样品，不会引起基体的太大变化。 解决的一种办法是，同比例增加试样、标样的体积，混匀后取部分体积进行分析。 (3)V1、Vs不受严格约束。 V1、Vs可大可小，Vs/V1可达10%左右。 那么Cs可以较小，Vs可以较大，减少误差，这种方式比较随意，容易实施，适用于组分简单的环境样品和绝大多数的实验项目。 式(1)也很好地反映出这种加标方式的随意性。 |分析。 (4)样品稀释比、加标量的确定是关键，要确保测定结果落在测试范围内。 同一样品也可进行一系列不同加标量的回收实验，保证实验1次成功。 2.4实施方法 对常规样品可凭经验实施，对于未知样品一般步骤为:①了解样品来源，初步估计待测物质含量;②确定稀释比和测试体积;③根据样品性质、分析方法选择加标方式;④确定加标量。 3用中间值计算回收率 中间值是指未计算成样品浓度的试验值，如分光光度法的吸光度A，容量分析法中的滴定体积数V(mL)，电极法中的电位值E(mV)等。 用样品及加标样的试验值直接进行计算，在特定条件下能简化计算过程，快速准确，但要注意中间值的可比性，因为中间值往往与许多参数有关，如样品稀释比、测试体积V测等，忽视这些因素就容易造成误算。 3.1用吸光度A计算 设样品吸光度为A1，测试体积为V测(1);加标样吸光度为A2，测试体积为V测(2)，其他假设同前。 在分光光度法中，吸光度通常与待测物质的含量(μg)建立回归方程为:A=a+b?W。

   加标回收

   浅析环境监测实验室内加标回收和质控样的适用情况加标回收实验是水质环境监测中常用的实验室内质控手段，经常运用于微量痕量级别的分光光度法。 加标回收率和质控已知样对某些实验结果具有优势。 加标回收率与待测样品的浓度水平关系不大，但在低通过控制加标量、加标间隔时间、加标溶液剩余量等3组实验，检验自动加标泵精密性和准确性，提出加标回收质控措施的适宜条件，并在水质自动站应用。 水质自动监测质控措施加标回收精密度准确度分析2002年01期加标回收在火试金法测定金含量中的运用本文阐述了在火试金法测定金合金中金含量的过程中，采用加标回收进行质量控制的方法步骤、计算方法及结果判定，为实验过程的质量控制选择提供一个新的思路。 2016年06期介绍采用加标回收试验和绘制回收率质控图进行质量控制的方法，结合海洋环境监测工作说明其在实验室内控中应用。 2008年03期加标回收质控图海洋环境监测随着我国科学技术的发展以及我国环境的变化，环境监控部门对环境的监测力度也逐渐加强。 本文概述了加标回收试验过程和质控图的运用，并结合水环境的监测工作，将监测的计算公式、图表内容以及相2016年02期介绍了加标回收实验和质控图作为质量控制的方法，并根据2012年实验室液相色谱-质谱联用法检测初级水产品中孔雀石绿和硝基呋喃类代谢物的加标回收率进行统计分析，其中质控图用Origin2013年04期为了解决分光光度法(HJ586-2010)在曲线绘制时存在低浓度点不显色现象，用于加标的次氯酸钠标准液不稳定且操作繁琐的现实缺陷。 采用不同显色时间及取消曲线制作过程中在加入硫酸溶液为判定用酶联免疫吸附法测定克伦特罗及其残留的结果准确性，笔者对猪尿、猪肝及猪血清中克伦特罗进行了检测及回收试验分析。

   实验六:回收试验

   实验六:回收试验 回收样品Ⅰ 回收样品Ⅱ回收样品Ⅲ平均回收率 加入浓度回收浓度 七、注意事项 1.分析物浓度应选择在医学决定水平附近，通常设置高、中、低三个浓度的回收。 2.纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样品体积的10%，以避免将血清稀释过度，引起误差的改变或消失。 六、结果计算 1.加入浓度计算: 加入浓度(mmol/L)=标准液病浓人标m样度准标lm品液l准量m量液l量 2.回收浓度计算: 回收浓度=回收样品测得浓度-基础样品测得浓 回收浓度 3.回收率加入计浓算度: 回收率= ×100% 4.计算结果请填入表内: 三、器材 微量移液器 Байдуномынсангаас 三用水浴箱 四、试剂 1.血清标本含血糖2.2mmol/L的血清2.葡萄糖标准液(80mmol/L)3.GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒 五、操作步骤 1、回收样品制备基础样品:血清0.9ml+0.1ml蒸馏水回收样品Ⅰ:血清0.9ml+0.01ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.09ml蒸馏水回收样品Ⅱ:血清0.9ml+0.06ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.04ml蒸馏水回收样品Ⅲ:血清0.9ml+0.09ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.01ml蒸馏水 3.加量是否准确对实验结果影响很大。 八、方法学评价 一般检验方法要求回收率在95%～105%之间，最为理想的回收率应是100%。 回收率接近100%，说明分析方法对于分析物无论在纯溶液中，还是在复杂的基体环境中，反应能力是一致的，分析物不受基体效应影响，若回收率明显偏离100%，说明分析物处于的基体环境不同，反应能力有明显差别。 2、按下表操作 加入物(ml) DDW0.01 5.55mmol/糖标 0.01 各个样品— 0.010.010.01 混匀，置水浴箱37℃，15分钟，505nm空白管调零，722型分光光度计分别测各管A值。 2、回收实验原理 将被测定物标准液加入病人标本中，作为分析样本;原病人标本中加入等量的无分析物的溶剂作为基础样本;用候选方法测定并得到各自浓度，计算回收浓度及回收率。

   DNA片段的回收实验- 实验方法

   产品实验品牌 搜实验 实验整体外包 实验室常规 实验室自动化 DNA片段的回收实验 目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术，回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。 4收藏1211阅读 树脂回收法 实验方法原理本方法特别适合于PCR片段的回收，具有纯度高、操作简洁等特点，经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。 通过15分钟的纯化过程，PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来，成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。 在较宽的分子量范围内有较高的回收效率。 下表为不同长度的DNA片断，在室温条件下，用此纯化系统直接纯化时，各自相应的回收率。 试剂、试剂盒 实验步骤 一、从琼脂糖介质中纯化DNA片断 1.用低熔点或常规熔点琼脂糖电泳对PCR扩增片断进行分离，该电泳安常规方法进行，缓冲液为TAE。 2.在凝胶上，找到所需条带，然后用洁净并灭菌的小刀将其切下接近300微升琼脂糖凝胶(约300毫克) 3.如果切下的琼脂糖为高融点的则安下面A步骤进行，如为低融点琼脂，则安B步骤进行。 A.将300微升琼脂块放进1.5毫升的微量离心管中，加入1毫升纯化用树脂，然后将其置于65℃水浴保温5分钟，或保温至琼脂完全溶解。 B.将300微升琼脂块放进1.5毫升的微量离心管中，然后将其置于70℃水浴保温至琼脂完全溶解，然后加入1毫升纯化用树脂到融化好的琼脂中，将其混合20秒，但不要振动。 4.为每一个待回收片断准备好一个微量柱。 在每个柱的开口处，联上一针筒，然后将这些柱与针筒的复合体与抽真空设备相连。 5.在柱-针筒复合体中加入树脂/DNA混合物，打开真空装置，将树脂与DNA的混合物抽到微量柱中，断开真空装置与柱的连接。 6.洗柱，加入2毫升80%的异丙醇，打开真空装置，使这些洗柱液完全流经微量柱。 7.继续真空30秒以干燥树脂，注意此干燥时间不能超过30秒。 关闭真空，移去针筒。 将微量柱转移至一1.5毫升微量离心管中。 10000g离心2分钟，以彻底除去残存的异丙醇。 8.将微量柱，再转移至一新的1。 5毫升微量离心管中，加入50微升水或TE缓冲液，静置1分钟(在头30秒，DNA仍将吸附于柱上)，10000g离心20秒，以洗脱DNA片断，所得纯化后的DNA片断可直接用于连接反应或在-20℃保存。 二、尿素丙烯酰胺变性胶中分离DNA片断 1.从变形胶上切下待回收片断，将其放如一微量离心管中。 2.加入100微升TE缓冲液，37℃保温30分钟以上。 3.将上清液吸入一新管中，加入1毫升树脂，振荡20秒以混匀树脂与清液。 注意事项 1.对于3Kb的片断在纯化回收时，洗脱前，如先将水或TE缓冲液预热到65-80℃，则将能有效的提高回收率。 待洗脱片断3Kb时，洗脱液温度应为65-80℃;待洗脱片断20Kb时，洗脱液温度应达80℃。 2.应用TAE缓冲液，而不应用含TBE的胶，因硼酸能与琼脂糖中的方式糖单体或多聚体结合成难溶复合物，这种复合物使胶难熔解。 3.在取用纯化柱树脂中的液体前，应将树脂充分搅匀，如树脂中出现结晶或结块，则应将树脂在25-37℃，温热10分钟，冷却至30℃使用。 树脂本身不会溶。 4.在紫外光下观察切割条带时，操作要快，DNA条带在紫外光下的暴露时间应尽量短，因UV会引起DNA变异。 经验交流

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   回收试验和干扰试验 BCP(溴甲酚紫)血清血红蛋白标准液操作步骤1回收试验样品制备基础样品:收集血清，双缩脲法测定白蛋白含量，醋酸纤膜电泳确定白蛋白浓度。 并进行适当稀释，使浓度在50g/L。 取血清0.9ml，加蒸馏水0.1ml。 干扰样品:血清中加入Hb溶液标准液2实验程序加入物U1U2U3U4标准液(40g/L)血清0.020.020.020.02BCP混匀1min，比色603nmU1回收样品基础值U2回收样品值U3干扰样品基础值U4干扰样品值U1=40U2=40回收值=U2-U1回收率=100%AU1回收值5.5U3=40U4=40干扰值=U4-U3干扰率=AU3干扰值基础值回收试验注意事项可疑干扰物浓度，加入的干扰物的浓度明显干扰常见浓度上限，尤其是达到病理标本最高值。